目前，全國正在對(duì)城區(qū)各農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的肉類攤點(diǎn)進(jìn)行豬鏈球菌病毒專項(xiàng)檢查，以杜絕市場(chǎng)無檢肉類存在。而面對(duì)疫情，更新驗(yàn)測(cè)方法則迫在眉睫。李典利蔡宏波攝
目標(biāo)鎖定
4小時(shí)即可知道結(jié)果的豬鏈球菌2型檢測(cè)方法，8月1日在北京通過了專家鑒定，而在過去，要獲得同樣的檢測(cè)結(jié)果，則需要4天的時(shí)間。面對(duì)重大突發(fā)應(yīng)急事件，中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院（以下簡(jiǎn)稱“檢科院”）與江蘇檢驗(yàn)檢疫局緊急聯(lián)合攻關(guān)，6天就建立了快速檢測(cè)方法，而原定時(shí)間是1個(gè)月。該方法快速、準(zhǔn)確，達(dá)到了國際先進(jìn)水平，對(duì)有效防范豬鏈球菌病的傳入傳出意義重大。
疫情/一聲令下
2005年6月，我國四川等地突然爆發(fā)所謂“怪病”，出現(xiàn)人員感染并有死亡報(bào)告。7月25日，衛(wèi)生部和農(nóng)業(yè)部聯(lián)合公布，自6月24日以來發(fā)生在四川的不明原因疾病是由豬鏈球菌2型感染引起的。
截至8月1日，累計(jì)發(fā)病174例，死亡34例。香港、廣東等地也有人感染的報(bào)告。
豬鏈球菌病是一種人畜共患的急性傳染病。豬鏈球菌分為35個(gè)血清型，以2型流行最廣，致病性最強(qiáng)，可引起豬的敗血癥、腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、支氣管炎，也可引起人的腦膜炎、心內(nèi)膜炎及永久性的聽力喪失。
盡管豬鏈球菌病是世界各國常見的一種豬傳染病，但由于該病發(fā)病迅猛，潛伏期短，短則兩小時(shí)，長(zhǎng)則2~3天，所以還是在群眾中引起了恐慌。
隨著疫情的發(fā)生、發(fā)展，從我國進(jìn)口豬和豬肉及其制品的一些國家和地區(qū)，先后提出停止進(jìn)口或入境時(shí)必須嚴(yán)格檢疫的要求。為了控制疫情，開發(fā)出一種方便、快捷、敏感的檢測(cè)技術(shù)勢(shì)在必行。
國家質(zhì)檢總局發(fā)出緊急通知，向有關(guān)貿(mào)易國和港澳有關(guān)單位進(jìn)行通報(bào)，并特別批示，要加強(qiáng)對(duì)豬鏈球菌快速檢測(cè)技術(shù)的研究，增加對(duì)豬鏈球菌2型的檢疫，并盡快制定檢疫標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)范。
7月26日一大早，檢科院副院長(zhǎng)、動(dòng)檢所所長(zhǎng)陳洪俊行色匆匆，動(dòng)檢所動(dòng)檢室的所有人員都被火速召集起來，發(fā)掘一切可利用的渠道，分工查詢。下午5時(shí)10分，一份《關(guān)于報(bào)送豬鏈球菌病有關(guān)建議和措施的報(bào)告》呈送到了質(zhì)檢總局有關(guān)司局的案頭。
韓雪清，清華大學(xué)生物系博士后；林祥梅，動(dòng)檢室主任，博士。兩位年輕的女性，是這個(gè)項(xiàng)目的負(fù)責(zé)人。參與此次實(shí)驗(yàn)的，還有賈廣樂、吳紹強(qiáng)、劉建、張永國、梅林等5位年輕的技術(shù)骨干。連續(xù)十幾個(gè)小時(shí)的實(shí)驗(yàn)，對(duì)這群年輕人來說，已是家常便飯。韓雪清告訴記者，一個(gè)星期以來，他們每天最多只能睡1小時(shí)。
豬鏈球菌病的流行病學(xué)非常復(fù)雜，目前國內(nèi)外檢測(cè)豬鏈球菌2型的方法，主要還是經(jīng)典的細(xì)菌分離、鑒定和血清學(xué)等方法，其周期長(zhǎng)，一般需3~7天。由于缺乏更加敏感、快速的診斷技術(shù)和檢測(cè)方法，一些人群耽誤了治療而導(dǎo)致死亡。
如何找到一種快速的檢測(cè)方法？科研組面臨的最大難題，首先是菌種的來源問題。
他們了解到，1998年、1999年連續(xù)兩年的夏季，在江蘇省的南通地區(qū)，曾爆發(fā)過大面積流行性豬鏈球菌2型，豬群的發(fā)病率和死亡率均在50%左右，并導(dǎo)致特定人群感染致死。
江蘇檢驗(yàn)檢疫局應(yīng)該有豬鏈球菌的研究基礎(chǔ)。那么，能不能采用江蘇檢驗(yàn)檢疫局的豬鏈球菌2型核酸，建立一種多重PCR方法呢？
攻關(guān)/廢寢忘食
7月27日下午，江蘇檢驗(yàn)檢疫局火速派出陳國強(qiáng)、張敬友飛往北京。雙方對(duì)技術(shù)方案進(jìn)行了反復(fù)論證。
7月28日上午10時(shí)，在國家質(zhì)檢總局的會(huì)議室里，動(dòng)植檢司和食品安全局的領(lǐng)導(dǎo)坐在了一起，再次對(duì)技術(shù)方案進(jìn)行研究。當(dāng)問及多長(zhǎng)時(shí)間能拿出多重PCR檢測(cè)方法時(shí)，陳洪俊一口答道：“一個(gè)星期！”而在此前申請(qǐng)立項(xiàng)的計(jì)劃書中，陳洪俊的目標(biāo)是：“爭(zhēng)取在2005年7月份完成所有豬鏈球菌2型快速檢測(cè)方法的建立。”
盡管檢科院擁有現(xiàn)代化的科研實(shí)驗(yàn)室，盡管他們具有一批攻關(guān)能力極強(qiáng)的技術(shù)隊(duì)伍，但一個(gè)月的計(jì)劃，壓縮在一周內(nèi)完成，說老實(shí)話，陳洪俊心里也沒底。可是，開弓沒有回頭箭。
一周內(nèi)，僅他們要完成的技術(shù)路線就有：引物的設(shè)計(jì)與合成，菌液培養(yǎng)，樣品前處理，基因組DNA提取，還要進(jìn)行PCR產(chǎn)物鑒定、特異性試驗(yàn)，以及豬鏈球菌在肉品中的監(jiān)測(cè)等等。
每天都是盒飯，每天1小時(shí)的睡眠，協(xié)調(diào)各項(xiàng)工作，陳洪俊的手機(jī)，半天就得換電池。副所長(zhǎng)施宗偉每晚都是凌晨?jī)牲c(diǎn)鐘才離開單位。
雖然江蘇檢驗(yàn)檢疫局有豬鏈球菌的研究基礎(chǔ)，可是科研組又面臨一個(gè)問題，就是菌種的生物安全問題。
活的菌種有安全之患，只有滅活的菌種才可以攜帶。如何才能拿到滅活的菌種呢？
他們把希望寄托在江蘇檢驗(yàn)檢疫局的同事們身上。為了這次特殊的任務(wù)，采集滅活的菌種，成了檢科院工作的重中之重。7月29日，檢科院院長(zhǎng)王大寧派陳洪俊等3人去江蘇，協(xié)商菌種一事。
江蘇檢驗(yàn)檢疫局局長(zhǎng)車文毅和副局長(zhǎng)陳建東當(dāng)即表示，一定盡全力支持、配合檢科院，完成此次任務(wù)。由于江蘇檢驗(yàn)檢疫局的雪中送炭，一份“檢科院須按照生物安全條例進(jìn)行運(yùn)輸、保存、使用，并負(fù)責(zé)由此產(chǎn)生的責(zé)任”的《滅活菌使用協(xié)議》，順利簽訂。
按照生物安全條例，菌種不允許航空運(yùn)輸，只能通過鐵路運(yùn)輸。當(dāng)晚，陳洪俊等人連夜飛回北京，留下一人坐火車，專程護(hù)送菌種進(jìn)京。
7月30日早8時(shí)，滅活的菌種安全到達(dá)北京，立即投入實(shí)驗(yàn)。中午1時(shí)，結(jié)果出來了。
成功/功在合作
7月30日下午3時(shí)，盡管是周六，盡管又困又累，但大家還是圍坐在一起，細(xì)心地將整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程梳理了一遍。
建立的多重PCR方法，是不是敏感，是不是特異，還有大量的實(shí)驗(yàn)要做。
除了采集市場(chǎng)上的豬、羊肉進(jìn)行污染驗(yàn)證外，他們還要做活菌的污染實(shí)驗(yàn)。而活菌的污染實(shí)驗(yàn)，必須在P3實(shí)驗(yàn)室才可以完成。
使用P3實(shí)驗(yàn)室有嚴(yán)格的管理規(guī)定。正值周末，到處找不到人。經(jīng)過多方聯(lián)系，中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院5所愿意為科研組提供P3實(shí)驗(yàn)室和豬鏈球菌2型標(biāo)準(zhǔn)株。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，多重PCR方法特異性強(qiáng)，敏感性高，包括樣品的前處理，僅用4個(gè)小時(shí)。不僅如此，該方法既可用于鑒定攜帶豬鏈球菌的豬，也可用于鑒定攜帶豬鏈球菌血清2型的豬。
陳洪俊懸著的一顆心，終于落了下來，他立即把這一消息報(bào)告給檢科院院長(zhǎng)王大寧和質(zhì)檢總局動(dòng)植檢司司長(zhǎng)俞太尉。王大寧要求，一定要把工作做扎實(shí)，爭(zhēng)取在8月1日召開成果鑒定會(huì)。
為了確保萬無一失，檢科院黨委書記兼副院長(zhǎng)秦貞奎、副院長(zhǎng)唐英章周末趕到一線，與大家一起，一字一句地對(duì)技術(shù)材料進(jìn)行修改、斟酌。
科技查新報(bào)告是鑒定會(huì)的必審程序。8月1日早7時(shí)，科研人員趕往中國農(nóng)科院信息研究所，中午12時(shí)，查新報(bào)告就出來了，只用了5個(gè)小時(shí)。而按照往常的經(jīng)驗(yàn)，科技查新報(bào)告程序復(fù)雜，至少需要7個(gè)工作日。
2005年8日1日下午3時(shí)，鑒定會(huì)在北京如期舉行。以中科院院士田波為主任委員的專家鑒定委員會(huì)一致認(rèn)為，針對(duì)我國突發(fā)豬鏈球菌病疫情，課題組在較短時(shí)間內(nèi)，設(shè)計(jì)了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的豬鏈球菌16S核糖體RNA、莢膜多糖（CPS2J）基因的特異性引物，建立了多重PCR方法檢測(cè)豬鏈球菌和豬鏈球菌2型。該項(xiàng)目設(shè)計(jì)合理，技術(shù)先進(jìn)，數(shù)據(jù)可靠，方法快速、準(zhǔn)確，為防止豬鏈球菌2型的傳入傳出、促進(jìn)相關(guān)動(dòng)物及其產(chǎn)品的進(jìn)出口貿(mào)易，提供了有力的技術(shù)支持，其整體研究達(dá)到國際先進(jìn)水平。
檢科院的快速反應(yīng)，緣于其雄厚的技術(shù)力量和高素質(zhì)的科研隊(duì)伍。
國家質(zhì)檢總局于大海研究員認(rèn)為，近年來，中國檢科院在重大突發(fā)應(yīng)急事件中，發(fā)揮了大局意識(shí)強(qiáng)、政治敏感性高、反應(yīng)迅速、科技攻關(guān)能力突出的特點(diǎn)，為我國貿(mào)易的正常進(jìn)行提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。比如2001年建立了動(dòng)物源性飼料中牛羊源性成分檢測(cè)方法，有效組織“瘋牛病”傳入境內(nèi)；2003年“非典”疫情期間，18天攻克了食品動(dòng)植物及其產(chǎn)品中SARS病毒的檢測(cè)技術(shù)研究；2005年紅火蟻疫情發(fā)生時(shí)，迅速研發(fā)出紅火蟻實(shí)時(shí)熒光PRC分子檢測(cè)方法，為疫情的防控發(fā)揮了重大作用。另外，在“炭疽熱”、“禽流感”、“農(nóng)獸藥殘留”、“蘇丹紅”等一系列熱點(diǎn)技術(shù)的研制上，均取得了重大突破。
作者：本報(bào)記者 王惜純/文
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